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      产品/Product
      2×SYBR Green Color qPCR Mix(彩色qPCR试剂盒)
      发布时间: 2018-09-27 14:13:19 | 次浏览

       


      产品名称 品牌 货号 规格 目录价
      2×SYBR Green qPCR Mix
      (ROX独立包装)
      EZBioscience A0001 5 ml 1000
      2×SYBR Green qPCR Mix
      (预混ROX1)
      EZBioscience A0001-R1 5 ml 1000
      2×SYBR Green qPCR Mix
      (预混ROX2)
      EZBioscience A0001-R2 5 ml 1000
      2×SYBR Green Color qPCR Mix(彩色qPCR试剂盒) EZBioscience A0012 5 ml 1200


      2× Color SYBR Green qPCR Master Mix


       
      Cat. No.: A0012
       
      一、试剂盒简介
      本试剂盒采用了具有超强扩增能力和抗干扰能力的热启动DNA聚合酶,结合其高度优化的缓冲液体系和染料系统,使之具备了更强的扩增效率、抗干扰能力,更高的灵敏度和特异性。具有起峰更早,在相同情况下得到的荧光信号更强,Ct值更小,熔解曲线特异性更高等特点。
      该试剂盒中EZBioscience™ 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix预混了蓝色惰性染料,当其与预混有黄色染料的样品缓冲液混合后,混合液会变成黄色。这在移液时为实验人员提供了视觉帮助,能够极大地降低发生移液错误的风险。
       
      二、产品组分

       

       

      Components A0012 (500Rxns)
      EZBioscience™ 2× Color SYBR Green qPCR Master Mix*1 5 ml
      Sample Buffer (40× ) 500 µl
      50× ROX Reference Dye 1*2 220 µl
      50× ROX Reference Dye 2*2 220 µl

      *1:包含Hot-start DNA Polymerase, dNTPs, Mg2+, 和blue dye。
      *2:用于校正不同孔之间产生的荧光信号误差。
       
      三、试剂保存条件
      本试剂建议置于-20℃避光保存。
       
      四、适用的仪器型号
      本试剂盒适用于所有的荧光定量PCR仪:

       

       

      使用ROX种类 qPCR仪型号
      不加ROX Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon 2, Chromo4™; Cepheid SmartCycler®;  Roche LightCyclerTM 480; Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Illumina Eco qPCR; Qiagen/Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000; Thermo Scientific PikoReal Cycler.
      ROX1 ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900, 7900HT, 7900HT Fast; StepOne™, StepOne Plus™
      ROX2 ABI 7500, 7500 Fast, Quanti-Studio 3, 5, 6, 7, 12K Flex, Dx, ViiA™7; Stratagene MX4000™, MX3000P™, MX3005P™

       
      五、关于qPCR反应是否良好的判断:
      1、如果扩增曲线呈典型的S型曲线,背景荧光信号阶段、荧光指数扩增阶段及平台期均完整可见,熔解曲线单峰,内参Ct值在合理范围内(通常可在13 ~ 22之间,典型的内参Ct值在15 ~ 20之间),则可认为该反应正常;
      2、如果同一个模板和引物的重复孔数据Ct值相差0.5以内;
      同时满足以上两个条件的可以认为数据可用。
       
      六、常见的注意事项、操作要点及优化方法:
      1、实验开始前首先验证引物是否适用,标准与上述标准类似,主要观察扩增曲线与熔解曲线;
      2、引物验证后应该分装为几份,防止污染或降解;
      3、RNA的质量及cDNA的质量对qPCR的结果具有很大的影响,应尽量保证RNA不降解,通常建议RNA提取后尽快进行逆转录,避免反复冻融,或者多次逆转录。如果预计使用量较大,则可以一次多逆转几管cDNA。如果条件允许,cDNA建议优先保存在-80℃冰箱
       
      七、关于qPCR引物的设计:
      1、首先可以查询Google Scholar中的文献当中的引物,通常中等及以上水平期刊中的qPCR引物绝大多数可以直接使用;
      2、NCBI数据库的Blast数据库中的primer blast提供了针对序列或者Gene ID的qPCR引物设计方案,可以每个基因设计2对引物,并进行合成、验证;
      3、Primer Bank数据库中有部分已经验证过的引物可用,也可作为参考。
       
       
      备注:PDF版英文说明书请在“技术资料”---“说明书下载”栏目中下载。



       

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